Expressão citofotométrica dos marcadores tumorais CD-34 e fator VIII no câncer de cólon / Cytophotometric expression of the tumor markers CD-34 and factor VIII in colorectal cancer

OBJETIVOS: Verificar a posssibilidade de quantificar a expressão dos marcadores tumorais CD-34 e Fator VIII no câncer de cólon; verificar se existe superioridade entre um marcador e outro para estudo da angiogênese; verificar se há correlação na análise do índice de marcagem e a densidade óptica média nos marcadores utilizados. MÉTODOS: Dezessete casos de adenocarcinoma colorretal recuperados de blocos de parafina e confirmados pela hematoxilina-eosina, foram submetidos à coloração imunoistoquímica pelo método da estreptoavidina-biotina-peroxidase e utilizados os marcadores tumorais CD-34 e Fator VIII. Após este processo as lâminas foram submetidas à leitura no sistema Samba 4000® e avaliadas pelo software Immuno®. Os parâmetros estudados foram: índice de marcagem e densidade óptica, expressos por médias, medianas, valores mínimos, valores máximos e desvios-padrão, analisados estatisticamente. RESULTADOS: Para o marcador CD-34 não houve normalidade dos dados em relação ao índice de marcagem e houve para a densidade óptica. Para o Fator VIII, houve normalidade de dados em relação ao índice de marcagem e para a densidade óptica. CONCLUSÃO: Foi possível quantificar a expressão dos marcadores tumorais CD-34 e Fator VIII através do índice de marcagem e da densidade óptica média; não houve diferença entre os marcadores em relação à média do índice de marcagem e da densidade óptica, não sendo possível definir superioridade entre um e outro; não foi observada tendência à correlação quando comparados densidade óptica e índice de marcagem do Fator VIII e do CD-34 isoladamente estudados; não houve correlação entre o índice de marcagem do Fator VIII quando comparado com o CD-34, bem como a densidade óptica do Fator VIII com o CD-34.

OBJECTIVES: In colorectal cancer, to describe the cytophotometric expression of the CD-34 and Factor VIII; to evaluate the degree of correlation between them; and to compare the CD-34 and Factor VIII expressions in relationship to label index and optical density. METHODS: Seventeen cases of colorectal adenocarcinoma recovered from paraffin-embedded archival tissue and confirmed by hematoxilin-eosin staining, were submitted to streptavidin-biotin-peroxidase immunohistochemical method. In this process was used the tumor markers CD-34 and Factor VIII. The obtained slides were analysed using the SAMBA 4000® system with Immuno® software. The results were evaluated into two parameters: label index and optical density, and expressed by averages, medians, minimum values, maximum values, and standard deviation values. The normality condition of the quantitative variables was investigated by using the Shapiro-Wilks test. In order to evaluate the degree of association between the expressions of the markers, Pearson's Correlation Coefficient or Spearman's Correlation Coefficient were applied. To evaluate the comparison degree of the markers expression, Student's t test or Wilcoxon's no parametric test were used. RESULTS: For the CD-34 there was no data normality for the label index and there was normality in the optical density. For the Factor VIII, there was data normality for the label index and for the optical density. CONCLUSION: When the expressions of CD-34 and Factor VIII markers were correlated, there was no difference between them in relationship to the average label index and average optical density. When the expressions of the CD-34 and Factor VIII were compared, there was no correlation between the two variables.

CD34 e caspase-3: comparação, correlação de expressão e quantificação imunoistoquímica no adenocarcinoma gástrico / CD34 and caspase-3: expression, quantification comparison and correlation in gastric adenocarcinoma

RACIONAL: O câncer gástrico continua a desafiar a medicina moderna a compreender o seu comportamento biológico e a melhorar seus índices de cura cirúrgica e taxa de sobrevivência. OBJETIVO: Comparar e correlacionar a expressão e a quantificação dos marcadores caspase-3 e CD34 no adenocarcinoma gástrico com fatores clínico-patológicos e com os tumores gástricos proximais e distais. MÉTODO: Foi utilizada análise imunoistoquímica quantitativa com os anticorpos anti-caspase-3 policlonal de coelho e CD43 monoclonal de rato, para marcar células do adenocarcinoma gástrico em 26 casos com CD34 e 22 com caspase-3 oriundos de blocos parafinados. As lâminas foram lidas para os parâmetros índice de marcagem em porcentagem, e densidade óptica em pixels. A leitura foi realizada pelo sistema SAMBA de citofotometria de imagem. RESULTADOS: As análises mostraram que a expressão dos marcadores caspase-3 e CD34 são elevadas, onde a média e o desvio-padrão para o índice de marcagem foram, respectivamente 87,72 por cento ± 7,89 e 84,86 por cento ± 9,17 e, para a densidade óptica, foram 60,75 ± 7,46 e 49,84 ± 8.48. Quando compararam-se os marcadores com a densidade óptica encontrou-se diferenças significativas entre a densidade óptica de caspase-3 (60,94) e a do CD34 (50,27) com P<0.001. A correlação entre os marcadores foi positiva para a densidade óptica de CD34 versus o índice de marcagem de CD34 com P=0.006, r=0,520 e para densidade óptica de caspase-3 versus índice de marcagem de caspase-3, com P=0.015, r=0.512. Não encontrou-se correlação dos marcadores quando compararam-se os índices de marcagem e as densidades ópticas com a curvatura gástrica, diferenciação tumoral, classificação de Borrmann, padrão tumoral ou invasão linfática. Os parâmetros clínicos sexo e idade também não se correlacionaram com os marcadores. A correlação com o local do tumor mostrou diferença entre os tumores de localização distal e proximal, onde a média da densidade de CD34 nos distais (52,44 ± 7,72) é maior do que a dos proximais (45,67 ± 6,06) com P=0.023. CONCLUSÃO: As expressões dos índices de caspase-3 e CD34 são elevados para o adenocarcinoma gástrico A comparação da densidade óptica de caspase-3 é maior do que a do CD34. Há correlação linear positiva entre a densidade óptica e o índice de marcagem tanto para CD34 quanto para caspase-3. Não há correlação da expressão e quantificação entre os marcadores caspase-3 e CD34 e os fatores clínico-patológicos estudados. A densidade óptica de CD34 no adenocarcinoma gástrico distal é maior do que a densidade óptica no proximal sugerindo que apresentam diferenças biológicas relacionadas com a localização do tumor.

BACKGROUND: Gastric cancer continues to defy the modern medicine in the understanding of its biological behavior and surgical cure. AIM: To determine, compare and correlate the expression of caspase-3 and CD34 in gastric adenocarcinoma with clinical and pathological factors and proximal/distal gastric tumors. METHODS: Imunohistochemistry quantitative analysis of the antibodies anti-caspase-3 polyclonal of rabbit and CD43 mouse's monoclonal, to mark adenocarcinoma cells in 26 CD34's cases and 22 caspase-3 paraffined blocks were used. The parameters were: labeling index in percentage and optic density. RESULTS: Caspase-3 and CD34 expression were elevated; the average and the deviation standard for labeling index were respectively 87,72 percent ±7,89 and 84,86 percent ±9,17; for optic desity 60,75±7,46 and 49,84±8.48. When markers were compared with optic density it was found significant differences between caspase-3 (60,94) and CD34 (50,27). Caspase-3 average (60,94) was higher than CD34 (50,27), P<0.001. The correlation among markers was positive for CD34's optic density versus labeling index of CD34 (P=0.006, r=0,520) and for optic density of caspase-3 versus caspase-3 labeling index (P=0.015, r=0.512). The markers had no correlation in the comparison of labeling index and optic densities with the gastric curvature, tumor differentiation, Borrmann classification and lymphatic invasion. Gender and age also did not correlate with the markers. The correlation with the tumor location had differences favoring the ones on distal part. CONCLUSION: Caspase-3 and CD34 expressions are elevated in gastric adenocarcinoma. Caspase-3 optic density is higher than CD34's optic density. There is no expression and quantification correlation between markers and the clinical and pathological factors, but there are evidences that they have biological differences when in different gastric anatomical parts.